病毒載體生產

基因轉殖、基因表達、基因編輯

慢病毒載體已廣泛應用於基因及細胞治療,並且是近年來熱門的CAR-T細胞之關鍵材料,也是目前分子及細胞生物實驗中非常有效的工具,作為一類來源於逆轉錄病毒的載體,其轉染效率高,且可以感染處於有絲分裂活躍期、分裂緩慢及分裂終末期的細胞,由慢病毒載體攜帶大量重要的遺傳訊息進入宿主細胞內可以得到長期而穩定的表達。此外,慢病毒載體不表達任何HIV-I蛋白,免疫原性低。經過改建後的慢病毒載體可以容納約10kb左右的外源基因,因此大多數的cDNA都能被克隆到慢病毒載體。這些優點使慢病毒載體成為體內和體外基因轉移的一種有效工具,有著廣泛的應用前景。

病毒載體種類

第二代慢病毒載體

第二代的三質粒表達系統,是將HIV-1基因組中負責包裝,逆轉錄和整合所需要的順式作用序列結構和編碼反式作用蛋白的序列分離,再克隆到三個獨立的質粒中,其中一個是包裝質粒,含有CMV啟動子,控制除env的所有病毒結構基因的表達,第二個是包膜質粒,含有表達水泡性口炎病毒糖蛋白(VSV-G)基因的序列,用於代替原病毒的env基因,這個基因的產物,可以提高病毒的宿主範圍,而另一個則是載體質粒,其中含有研究人員所感興趣的基因序列結構。但這個三質粒系統還是保留了HIV-1的附屬基因,這個質粒體系產生意外而導致出現具有活性的病毒的可能較大,因而被認為安全係數較低,但因其製作病毒之效價較高,較適合研究使用。

第三代慢病毒載體

第三代質粒系統,研究人員對第二代的三質粒系統也做了進一步改進,這也是目前被臨床上廣泛使用的慢病毒載體系統,去除了HIV病毒所有輔助因序列,HIV原有的9個基因保留3個(gag、pol、rev)於構建的慢病毒載體中,且將env基因放在一個單獨的表達質粒上,此外,還將tat基因去除,這樣就形成了四個質粒的系統,即Gag/Pol、Rev、VSV-G,此外,還有一個可以放置目的基因序列的載體。這個組合大幅減少重組活性病毒的可能性。

睿田的技術

睿田生技成功開發生產高效率慢病毒的技術平台,並且應用在睿田現有的CAR-T製程上。有別於一般常見慢病毒,經由睿田技術優化後能有效提升慢病毒產量、濃度及後續使用的感染效率;而睿田能提供二代、三代兩種病毒包裹及RUO、Pre-clinical兩種等級委託製作,三代相較於一般二代慢病毒技術則是大幅提高基因改造細胞的安全性,降低病患承擔的風險。此外,我們也正在開發半自動化儀器的方式生產,可進一步提升慢病毒產量、生產效率以及降低人為操作。

代工生產病毒載體服務

Research grade Lentivirus

接受委託代工開發生產二代、三代兩種病毒載體

Pre-Clinical grade Lentivirus

    接受委託代工開發生產二代、三代兩種病毒載體

睿田的病毒載體生產優勢

高力價

提供>10⁷ TU/ml高titer病毒液

高產量

提供≤1500ml高產量病毒液

高品質

提供>5項QC檢測項目通過病毒液